"Če bodo naši začetni rezultati lahko ponovljeni v drugih laboratorijih, bodo to spremenili način, kako trenutno razmišljamo o vzrokih za Alzheimerjevo bolezen, " pravi dr. Ramón Trullas, profesor na Višjem svetu za znanstveno raziskovanje (CSIC ) na Biomedicinskem raziskovalnem inštitutu v Barceloni in vodilni avtor študije. Po njegovem mnenju bi to odkritje lahko omogočilo iskanje učinkovitejših načinov zdravljenja v predklinični fazi.
Trenutno je edini način za natančno diagnozo bolezni postmortem nevropatološka analiza. Povezava med znanimi biomarkerji z boleznijo je nejasna, zato je skoraj nemogoče diagnosticirati predklinične stopnje z resnično gotovostjo.
Raziskovalci CSIC v svojem delu kažejo, da je lahko zmanjšanje vsebnosti mitohondrijske DNK (mtDNA) v CSF predklinični pokazatelj Alzheimerjeve bolezni; po drugi strani pa lahko obstaja neposredna vzročna zveza. Hipoteza je, da zmanjšanje ravni mitohondrijske DNK v CSF odraža zmanjšanje sposobnosti mitohondrijev za napajanje možganskih nevronov, kar povzroči njihovo smrt.
Znižanje koncentracije mtDNA pred pojavom znanih Alkheimerjevih biokemičnih biomarkerjev (beta-amiloid 1-42, T-tau in p-tau proteini), kar kaže na patofiziološki proces Alzheimerjeve bolezni Začne se prej, kot se je prej mislilo in da je lahko njegovo izčrpavanje mtDNA eden prvih napovedovalcev bolezni.
Poleg tega, da omogoča preiskavo možne vzročne povezave mtDNA in napredovanja Alzheimerjeve bolezni, uporaba mtDNA kot indeksa predklinične Alzheimerjeve bolezni zagotavlja pomembno prednost pred prejšnjimi biokemičnimi markerji: odkrivanje tega novega biomarkerja nukleinske kisline Manjkajo tehnične težave, povezane z odkrivanjem beljakovin. MtDNA lahko enostavno določimo s količinsko ali v realnem času PCR (qPCR) ali z "Doplet Digital PCR" (ddPCR).
Pred to raziskavo raziskovalci niso poročali, da lahko v človeškem CSF zaznamo proste celice, ki krožijo v mtDNA. Vendar pa je s to študijo ekipi dr. Trullasa uspelo kvantitativno zaznati in razmnoževati mtDNA z uporabo qPCR, skrbno optimiziranega z upoštevanjem smernic MIQE.
Absolutno količinsko določanje ciljnih molekul
Za potrditev svojih rezultatov z qPCR so znanstveniki uporabili digitalni PCR sistem QX100 Droplet Digital PCR iz Bio-Rad Laboratories. Za razliko od qPCR testov sistem QX100 zagotavlja absolutno količinsko določitev ciljnih molekul DNK brez potrebe po standardni krivulji. Pomemben dejavnik za analizo CSF je bil, da sistem "Doplet Digital PCR" ne potrebuje čiščenja vzorca za odstranjevanje zaviralcev PCR, kot je to potrebno za teste qPCR.
"Doplet Digital PCR" nam je omogočil potrditev začetnih meritev qPCR, saj omogoča absolutno količinsko določitev na ravni ene same molekule, ne da bi se zanašali na standardno krivuljo, "razlaga Trullas. "Ko tehnologija postane širše sprejeta, predvidevamo, da bo ddPCR prihodnost odkrivanja mitohondrijske DNK v cerebrospinalni tekočini, " dodaja.
Dr Trullas upa, da bodo drugi laboratoriji in bolnišnice uspešno ponovili rezultate raziskav njegove skupine, ki bi potrdile, da je treba zmanjšati raven mtDNA kot možen vzrok Alzheimerjeve bolezni. Z iskanjem načina, kako preprečiti to degeneracijo, bodo zdravniki lahko diagnosticirali in zdravili Alzheimerjevo bolezen, preden se pojavijo simptomi.
Vir: www.DiarioSalud.net
